EVG染色
所屬分(fēn)類：
一、實驗原理(lǐ)
EVG染色，全稱為(wèi)Verhoeff's Van Gieson染色，能(néng)對組織中(zhōng)的彈性纖維和膠原纖維分(fēn)别進行顯色，将彈性纖維染成黑色，而膠原纖維染成紅色。組織被含有(yǒu)三氯化鐵和碘的蘇木(mù)精(jīng)染色，再用(yòng)過量的媒染劑三氯化鐵中(zhōng)斷組織與與染料的結合，分(fēn)化液中(zhōng)大量的媒染劑可(kě)以将染料吸引從而将染料從組織中(zhōng)清除。由于彈性纖維對鐵蘇木(mù)精(jīng)具(jù)有(yǒu)較強的吸引力使得染料能(néng)比其他(tā)組織保留更久而達到染色的效果。
二、實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水。
2、切片入配制好的Verhoeff染色液的中(zhōng)浸染 15-30min，至顔色呈深黑色。
3、流水沖洗，除去多(duō)餘的染液。
4、用(yòng)Verhoeff分(fēn)化液分(fēn)化至彈力纖維清晰為(wèi)止(鏡下觀察)。
5、流水充分(fēn)沖洗。
6、用(yòng)95%乙醇處理(lǐ)數秒(miǎo)，快速脫碘。
7、流水沖洗2-3min。
8、将切片放入5%硫代硫酸鈉溶液中(zhōng)3min。
9、流水充分(fēn)沖洗，蒸餾水沖洗。
10、VG染色液複染1min。
11、95%乙醇快速分(fēn)化。
12、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中(zhōng)性樹膠封片。
三、結果判讀：
彈力纖維：黑色
膠原纖維：紅色
肌纖維、纖維素、神經膠質(zhì)：黃色
四、注意事項：
1、臨用(yòng)前配制試劑(A)，不可(kě)預先配制後放置，一般6h後失去染色力。
2、Verhoeff分(fēn)化液分(fēn)化時，應在顯微鏡下控制分(fēn)化程度，以免過染或淡染。
3、用(yòng)95%乙醇脫碘數秒(miǎo)，鏡下觀察，如分(fēn)化過度，可(kě)返回第2步重染。
4、VG複染時，不要超過1min。
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