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普魯士藍+DAB染色

普魯士藍鐵染色法 (Perl's lron Stain) 是檢測細胞和組織中(zhōng)非血紅素鐵的常用(yòng)組織化學(xué)方法之一，通過形成藍色的普魯士藍沉澱檢測骨髓及肝、脾、腎等組織細胞中(zhōng)的鐵蛋白和含鐵血黃素沉積。該染色方法可(kě)以很(hěn)好的區(qū)分(fēn)含鐵血黃素和其他(tā)色素，但是受限于染色原理(lǐ)，對于低于 30uM/g 的鐵含量很(hěn)難形成肉眼可(kě)見的陽性标記。

所屬分(fēn)類：

關鍵詞：普魯士藍+DAB染色

　　一、實驗原理(lǐ)

　　普魯士藍鐵染色法 (Perl's lron Stain) 是檢測細胞和組織中(zhōng)非血紅素鐵的常用(yòng)組織化學(xué)方法之一，通過形成藍色的普魯士藍沉澱檢測骨髓及肝、脾、腎等組織細胞中(zhōng)的鐵蛋白和含鐵血黃素沉積。該染色方法可(kě)以很(hěn)好的區(qū)分(fēn)含鐵血黃素和其他(tā)色素，但是受限于染色原理(lǐ)，對于低于 30uM/g 的鐵含量很(hěn)難形成肉眼可(kě)見的陽性标記。

　　二、實驗步驟

　　1. 臨用(yòng)前配制 Perls 染色工(gōng)作(zuò)液，滴加覆蓋切片染色 15-30min，蒸水浸洗 5-10min。

　　2.DAB 顯色液滴染約 5-10min，顯微鏡下控制顯色程度。

　　3、染核：蘇木(mù)素染色 1min，水洗，鹽酸水溶液分(fēn)化，水洗，氨水水溶液返藍， 水洗。

　　4、脫水透明封片。

　　三、結果判讀

　　組織中(zhōng)含有(yǒu)鐵元素的部位呈棕褐色，細胞核呈淺藍色，背景呈淺棕色或無色

　　四、注意事項：

　　1、普魯士藍 DAB 染液要現配現用(yòng)。

　　2、切片染色前用(yòng)蒸餾水洗幹淨，防止自來水中(zhōng)的鐵離子在染色中(zhōng)反應，造成假陽性。

　　3、在 DAB 的顯色過程中(zhōng)，每隔約 5min 需要在顯微鏡下觀察顯色效果，由普魯士藍染出的 弱陽性(即淺藍色)被 DAB 替代形成棕色或者無藍色的部位變成棕色即可(kě)。

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