


油紅染色
所屬分(fēn)類:
一、實驗原理(lǐ)
油紅O染料在脂質(zhì)中(zhōng)的溶解度大于在有(yǒu)機溶劑的溶解度,所以染色時染料便從染液中(zhōng)轉移到被染的脂質(zhì)中(zhōng)去,使脂質(zhì)呈現出紅色。常用(yòng)于鑒别肝空泡變形的性質(zhì),心肌、血管等脂質(zhì)沉積;由于脂質(zhì)易溶于有(yǒu)機溶劑,一般應采用(yòng)冰凍切片。
二、實驗步驟
1、将冰凍切片複溫幹燥,PBS洗3次,每次5min。
2、加入緩沖液(不超過2min)不洗(甩掉緩沖液),切片入油紅染液浸染20min(加蓋避光)。
3、分(fēn)化液快速分(fēn)化,蒸餾水洗。
4、蘇木(mù)素複染3-8min,蒸餾水洗,鹽酸酒精(jīng)快速分(fēn)化1s,蒸餾水洗,氨水水溶液返藍,蒸餾水洗。
5、封片:甘油明膠封片。
三、結果判讀:
脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細胞核藍色。
四、注意事項:
1、如果是新(xīn)鮮組織冰凍切片,需要先固定再染色;如果組織是固定以後冰凍切片,可(kě)以将切片晾幹以後,直接染色。
2、整個操作(zuò)過程中(zhōng)注意動作(zuò)輕緩,不宜動作(zuò)太大,以免脂肪丢失或者移位。
染色結果不能(néng)長(cháng)期保存,封片後應盡快觀察及拍照。
甘油明膠常溫下為(wèi)凝固狀,一般60℃烤箱中(zhōng)保存。封片後如有(yǒu)氣泡不能(néng)按壓玻片也不宜
強行扯下蓋玻片,玻片可(kě)入溫水中(zhōng),讓蓋玻片自行脫落,然後重新(xīn)封片,以防脂肪移位。
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