細胞劃痕

　　細胞劃痕是通過在細胞單層上劃痕并通過延時顯微鏡定期捕獲圖像

所屬分(fēn)類：

細胞生物(wù)學(xué)

關鍵詞：細胞劃痕

産(chǎn)品咨詢

應用(yòng)簡介

　　細胞劃痕是通過在細胞單層上劃痕并通過延時顯微鏡定期捕獲圖像，從而研究細胞遷移運動、修複能(néng)力和細胞間相互作(zuò)用(yòng)的實驗室技(jì )術。可(kě)用(yòng)于觀察藥物(wù)、基因等外源因素對細胞遷移、修複和相互作(zuò)用(yòng)的影響。

技(jì )術原理(lǐ)

　　在融合的單層細胞上人為(wèi)制造一個空白區(qū)域，稱為(wèi)“劃痕/傷口”，劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕/傷口”愈合，于細胞遷移過程中(zhōng)在開始和定期捕獲圖像，通過測量不同時間點的劃痕間距并計算差值，可(kě)對細胞的遷移能(néng)力做出判斷。

實驗方法

　　Step1：劃線(xiàn)

　　Step2：細胞鋪闆

　　Step3：藥物(wù)處理(lǐ)

　　Step4：劃痕

　　Step5：清洗

　　Step6：拍照

　　Step7：Image J分(fēn)析結果

技(jì )術總結

　　1.劃線(xiàn)的目的隻是為(wèi)了輔助劃痕時劃的更直，有(yǒu)利于後續拍照分(fēn)析，劃線(xiàn)會在拍照前擦去。

　　2.細胞接種數量需根據細胞生長(cháng)速度和狀态而定，接種原則為(wèi)過夜後融合率達到約100%，即細胞間基本沒有(yǒu)空隙，否則會影響後續拍照分(fēn)析。

　　3.沖洗時要溫柔，貼壁加入，避免沖掉單層細胞，反複多(duō)次沖洗，盡量洗掉所有(yǒu)的細胞碎片。

　　4.降低細胞增殖對遷移造成的假陽性結果的方法：①使用(yòng)無血清或低血清培養基(<2%)可(kě)降低細胞增殖對實驗結果的影響；②一般認為(wèi)24h為(wèi)細胞的一個周期，在選取合适的時間點(6，12，24h)檢測劃痕寬度時，最好不要超過細胞一個周期的時間；③如果要單純考慮細胞遷移，可(kě)以先用(yòng)絲裂黴素(1µg/ml)處理(lǐ)1h，抑制細胞的分(fēn)裂。

上一頁(yè)： MTT/CCK8

下一頁(yè)： Transwell遷移/侵襲

更多(duō)産(chǎn)品