流式細胞表面染色

細胞表面标志(zhì)物(wù)可(kě)根據譜系和發育階段定義細胞亞群，還可(kě)根據用(yòng)熒光抗體(tǐ)标記并通過流式細胞術分(fēn)析時的功能(néng)進行定義。

所屬分(fēn)類：

流式細胞術

關鍵詞：流式細胞表面染色

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　　細胞表面标志(zhì)物(wù)可(kě)根據譜系和發育階段定義細胞亞群，還可(kě)根據用(yòng)熒光抗體(tǐ)标記并通過流式細胞術分(fēn)析時的功能(néng)進行定義。這些表面标志(zhì)物(wù)具(jù)有(yǒu)不同的形式和功能(néng)，包括可(kě)溶性配體(tǐ)和細胞結合配體(tǐ)的受體(tǐ)、離子通道、糖蛋白、磷脂等。根據細胞群或者細胞亞群的特征表型設門，将其顯示于一個流式圖上，流式圖的一個軸代表其中(zhōng)一個需要測定的表型的熒光信息，圈出表型陽性的細胞或者計算平均熒光強度(mean fluorecence intensity,MFI),就可(kě)以得出這群細胞或者細胞亞群表達該抗原分(fēn)子的情況。

　　1、在流式管中(zhōng)加入單細胞懸液，按說明書加入表面抗體(tǐ)。渦旋震蕩混勻，室溫避光孵育15-30分(fēn)鍾或冰上孵育30-60分(fēn)鍾；

　　2、每管加入2 ml 1×紅細胞裂解液，渦旋震蕩混勻，冰上避光孵育10分(fēn)鍾。2-8℃300-500×g離心5分(fēn)鍾，棄上清；（樣本不含紅細胞時跳過此步驟）

　　3、每管加入2 ml PBS，渦旋震蕩混勻。2-8℃300-500×g離心5分(fēn)鍾，棄上清；

　　4、每管加入500μl 1×Flow Cytometry Staining Buffer重懸，上機檢測。