

細胞鬼筆(bǐ)環肽染色-共聚焦拍照實驗報告
一、實驗器材及試劑
- 實驗器材
名(míng)稱 |
廠家 |
型号 |
潔淨工(gōng)作(zuò)台 CO2恒溫培養箱 |
蘇淨安(ān)泰 PHC株式會社 |
SW-CJ-1FD MCO-18AC |
載玻片及蓋玻片 |
江蘇世泰實驗器材有(yǒu)限公(gōng)司 |
10212432C |
渦旋混勻儀 |
賽默飛世爾 |
LP Vortex Mixer |
移液槍 |
Dragon |
KE0003087/KA0056573 |
組化筆(bǐ) |
Gene tech |
GT1001 |
生物(wù)顯微鏡(熒光) |
甯波舜宇儀器有(yǒu)限公(gōng)司 |
CX40 |
成像系統 |
甯波舜宇儀器有(yǒu)限公(gōng)司 |
CX40 |
二、細胞爬片鬼筆(bǐ)環肽染色實驗步驟
- 細胞固定并破膜:培養好的細胞爬片倒去培養基,用(yòng)PBS洗。4%多(duō)聚甲醛固定10min,PBS洗3次,每次10min,滴加0.5%Triton X-100,破膜5min,PBS洗3次,每次10min。
- 加鬼筆(bǐ)環肽:爬片稍甩幹後用(yòng)組化筆(bǐ)在蓋玻片中(zhōng)間細胞分(fēn)布均勻的位置畫圈(防止液體(tǐ)流走),加200μl鬼筆(bǐ)環肽工(gōng)作(zuò)液,室溫避光孵育30min,PBS洗3次,每次5 min。
- DAPI複染細胞核并封片:将蓋玻片倒置在滴有(yǒu)DAPI的抗熒光淬滅封片劑的載玻片上,對細胞核進行複染,約30s,并封片。
- 鏡檢拍照:顯微鏡下觀察并采集圖像。
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