技(jì )術服務(wù)
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鬼筆(bǐ)環肽染色


培養好的細胞爬片倒去培養基,用(yòng)PBS洗。

所屬分(fēn)類:

關鍵詞:鬼筆(bǐ)環肽染色

細胞鬼筆(bǐ)環肽染色-共聚焦拍照實驗報告

一、實驗器材及試劑

  1. 實驗器材

名(míng)稱

廠家

型号

潔淨工(gōng)作(zuò)台

CO2恒溫培養箱

蘇淨安(ān)泰

PHC株式會社

SW-CJ-1FD

MCO-18AC

載玻片及蓋玻片

江蘇世泰實驗器材有(yǒu)限公(gōng)司

10212432C

渦旋混勻儀

賽默飛世爾

LP Vortex Mixer

移液槍

Dragon

KE0003087/KA0056573

組化筆(bǐ)

Gene tech

GT1001

生物(wù)顯微鏡(熒光)

甯波舜宇儀器有(yǒu)限公(gōng)司

CX40

成像系統

甯波舜宇儀器有(yǒu)限公(gōng)司

CX40

二、細胞爬片鬼筆(bǐ)環肽染色實驗步驟

  1. 細胞固定并破膜:培養好的細胞爬片倒去培養基,用(yòng)PBS洗。4%多(duō)聚甲醛固定10min,PBS洗3次,每次10min,滴加0.5%Triton X-100,破膜5min,PBS洗3次,每次10min。
  2. 加鬼筆(bǐ)環肽:爬片稍甩幹後用(yòng)組化筆(bǐ)在蓋玻片中(zhōng)間細胞分(fēn)布均勻的位置畫圈(防止液體(tǐ)流走),加200μl鬼筆(bǐ)環肽工(gōng)作(zuò)液,室溫避光孵育30min,PBS洗3次,每次5 min。
  3. DAPI複染細胞核封片将蓋玻片倒置在滴有(yǒu)DAPI的抗熒光淬滅封片劑的載玻片上,對細胞核進行複染,約30s,并封片。
  4. 鏡檢拍照:顯微鏡下觀察并采集圖像。

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