
技(jì )術服務(wù)
麥胚凝集素(WGA)是從谷物(wù)中(zhōng)提取出來,可(kě)以特異性的結合心肌細胞膜上的一種糖蛋白,二者結合起來可(kě)以将心肌細胞膜染出來。WGA可(kě)以把心肌細胞膜染出來,這樣是否肥大的細胞從圖像與正常組的對比就可(kě)以看出,也可(kě)以用(yòng)專門的軟件對染出的細胞進行直徑、面積等的測量,能(néng)夠分(fēn)析心肌細胞是否肥大。
用(yòng)于檢測細胞内ROS最廣泛采用(yòng)的方法是DCFH-DA熒光探針法。DCFH-DA(二氯熒光黃雙乙酸鹽)是一種可(kě)指示的探針,其本身不具(jù)有(yǒu)熒光,但可(kě)以自由穿過細胞膜。一旦進入細胞,它會被細胞内的酯酶水解成DCFH。由于DCFH無法穿過細胞膜,因此熒光探針會在細胞内積聚。細胞内的ROS能(néng)夠氧化無熒光的DCFH,生成有(yǒu)熒光的DCF,且熒光強度與ROS水平成正比。通過熒光顯微鏡、流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡等設備,在最大激發波長(cháng)480nm和最大發射波長(cháng)525nm下檢測熒光信号。