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考馬斯亮藍染色


考馬斯亮藍染色法是一種常用(yòng)的蛋白定性定量分(fēn)析方法,主要用(yòng)于SDS-PAGE凝膠電(diàn)泳後的蛋白質(zhì)染色。
關鍵詞:考馬斯亮藍染色

原理(lǐ)


  考馬斯亮藍染色法是一種常用(yòng)的蛋白定性定量分(fēn)析方法,主要用(yòng)于SDS-PAGE凝膠電(diàn)泳後的蛋白質(zhì)染色,考馬斯亮藍染料可(kě)以與蛋白質(zhì)中(zhōng)的多(duō)個氨基酸(如賴氨酸、精(jīng)氨酸等)結合,形成複合物(wù),使原本無色透明的凝膠條帶上蛋白質(zhì)被染成藍色,從而可(kě)以進行可(kě)視化分(fēn)析。

步驟


  1.電(diàn)泳:通過SDS-PAGE電(diàn)泳分(fēn)離蛋白質(zhì)。

  2.染色:電(diàn)泳結束後,将凝膠放入含考馬斯亮藍染色液的容器中(zhōng),室溫下搖動染色,直至凝膠與染色液顔色接近。

  3.脫色:将凝膠從染色液中(zhōng)取出,放入脫色液中(zhōng)進行脫色,直至條帶、背景清晰。

  4.觀察與記錄:拍照分(fēn)析。

送樣要求


  1.組織:新(xīn)鮮或冷凍組織,100mg以以上;

  2.細胞:10^7個以上,細胞沉澱或者加裂解液處理(lǐ);

  3.蛋白:變性蛋白。

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