


細胞培養/傳代/凍存
所屬分(fēn)類:
應用(yòng)簡介
細胞培養是指在體(tǐ)外模拟體(tǐ)内環境,使細胞生存、生長(cháng)、繁殖并維持其主要結構和功能(néng)的一種方法,通過細胞培養我們可(kě)以獲得大量的、性狀相同的細胞,以便于研究細胞的形态結構、化學(xué)組成及功能(néng),又(yòu)可(kě)以借此研究細胞的信号轉導、細胞的合成代謝(xiè)、細胞的生長(cháng)增殖等。
技(jì )術原理(lǐ)
細胞培養是指細胞在體(tǐ)外的培養技(jì )術,即在無菌條件下,從機體(tǐ)中(zhōng)取出組織或細胞,或者使用(yòng)購(gòu)買的細胞系,模拟機體(tǐ)内正常生理(lǐ)狀态下生存的基本條件(無菌、适宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),讓它在培養皿中(zhōng)繼續生存、生長(cháng)和繁殖的方法。常見細胞培養為(wèi)貼壁培養和懸浮培養。
實驗方法
Step1:細胞複蘇
Step2:細胞培養
Step3;細胞傳代
Step4:細胞凍存
Step5:後續細胞實驗
技(jì )術總結
1.在細胞培養過程中(zhōng)最重要的是做好無菌操作(zuò);
2.細胞複蘇的口訣:快速解凍,因此需要提前打開水浴鍋升溫到37℃備用(yòng);
3.細胞長(cháng)到85-90%左右就可(kě)以考慮傳代,選擇适合的傳代比例,保證細胞在使用(yòng)時是處于良好的生長(cháng)狀态;
4.細胞凍存遵循“慢凍”原則;細胞凍存液最好現配現用(yòng);凍存細胞必須處在對數生長(cháng)期,細胞活率大于90%;凍存細胞濃度因細胞種類而異,太低的細胞濃度會影響後期細胞的複蘇。
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