技(jì )術服務(wù)
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切片


實驗介紹:石蠟切片組織學(xué)常規制片技(jì )術中(zhōng)廣泛應用(yòng)的方法。石蠟切片不僅用(yòng)于觀察正常細胞組織的形态結構,也是病理(lǐ)學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科(kē)用(yòng)以研究、觀察及判斷細胞組織的形态變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用(yòng)于其他(tā)許多(duō)學(xué)科(kē)領域的研究中(zhōng)。教學(xué)中(zhōng),光鏡下觀察切片标本多(duō)數是石蠟切片法制備的。活的細胞或組織多(duō)為(wèi)無色透明,各種組織間和細胞内各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區(qū)别出;組織離開機體(tǐ)後很(hěn)快就會死亡和産(chǎn)生組織腐敗,失去原有(yǒu)正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能(néng)清晰辨認其形态結構。
關鍵詞:切片

  石蠟切片;

  實驗介紹:石蠟切片組織學(xué)常規制片技(jì )術中(zhōng)廣泛應用(yòng)的方法。石蠟切片不僅用(yòng)于觀察正常細胞組織的形态結構,也是病理(lǐ)學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科(kē)用(yòng)以研究、觀察及判斷細胞組織的形态變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用(yòng)于其他(tā)許多(duō)學(xué)科(kē)領域的研究中(zhōng)。教學(xué)中(zhōng),光鏡下觀察切片标本多(duō)數是石蠟切片法制備的。活的細胞或組織多(duō)為(wèi)無色透明,各種組織間和細胞内各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區(qū)别出;組織離開機體(tǐ)後很(hěn)快就會死亡和産(chǎn)生組織腐敗,失去原有(yǒu)正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能(néng)清晰辨認其形态結構。

  實驗交付:切好的玻片。

切片切片

  實驗步驟:将修整好的蠟塊置于石蠟切片機切片,厚3-4μm。切片漂浮于攤片機40℃ 溫水上将組織展平,載玻片将組織撈起,60℃ 烘箱内烤片。水烤幹蠟烤化後取出常溫保存備用(yòng)。

  送樣及運輸保存要求:組織蠟塊,常溫運輸保存

  組織芯片切片:

  實驗介紹:組織芯片是将許多(duō)不同個體(tǐ)組織标本以規則陣列方式排布于同一載玻片上,進行同一指标的原位組織學(xué)研究。客戶提供供體(tǐ)組織或蠟塊,在芯片制作(zuò)過程中(zhōng)首先将供體(tǐ)組織包埋成供體(tǐ)蠟塊,按照客戶要求用(yòng)取樣針從供體(tǐ)蠟塊上将目的區(qū)域的組織取出并按照客戶要求将不同的組織點排列在事先制作(zuò)好的受體(tǐ)蠟塊上。然後将排列好的組織點與受體(tǐ)蠟塊進行融合成一個蠟塊再進行後續的切片。切出來的片子同一載玻片上包含了客戶需要同時觀察和對比的所有(yǒu)組織,這樣的切片用(yòng)于後續進行染色或免疫組化/熒光操作(zuò)即可(kě)将載玻片上所有(yǒu)的組織點條件控制一緻,這樣比一個組織一張切片操作(zuò)起來更方便快捷,組織間對比更明顯結果更可(kě)靠。

  實驗交付:切好的組織芯片玻片。

  實驗步驟:将修整好的組織芯片蠟塊置于石蠟切片機切片,厚3μm。切片漂浮于攤片機37℃ 溫水上将組織芯片展平,載玻片将組織芯片撈起,過夜烘幹水分(fēn),60℃ 烘箱内烤片。水烤幹蠟烤化後取出常溫保存備用(yòng)。

  送樣及運輸保存要求:組織芯片蠟塊,常溫運輸保存

  封蠟:

  實驗介紹:封蠟是在普通石蠟切片和切過的組織蠟塊基礎上,将短時間做不了實驗的切片和組織蠟塊進行一層蠟膜包裹。如後續需要做實驗,再将切片置于67℃的烘箱内烤片,直至蠟膜融化即可(kě)進行後續實驗;組織蠟塊可(kě)再次修蠟後進行切片。

  封片的優勢在于可(kě)以避免蠟塊中(zhōng)和玻片上的組織因為(wèi)長(cháng)時間不做實驗,導緻氧化,脫落等情況。

  實驗交付:封好蠟的組織玻片和組織蠟塊

  送樣及運輸保存要求:常溫運輸保存

  冰凍切片:

  實驗介紹:冰凍切片是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然後進行切片的方法。因其制作(zuò)過程較石蠟切片快捷、簡便,且不經過酒精(jīng)、二甲苯等有(yǒu)機溶劑及高溫環境。可(kě)較好的保存脂類,酶類等易于溶解有(yǒu)機溶劑的物(wù)質(zhì)。對切片厚度的要求也可(kě)以更好的滿足。

  實驗交付:切好的片子及OCT包埋塊

切片

  實驗步驟:新(xīn)鮮組織取材并OCT包埋/固定組織經過15%-30%梯度蔗糖溶液脫水後取材并OCT包埋,然後按指定要求切片。

  送樣及運輸保存要求:

  1、新(xīn)鮮組織須幹冰保存運輸,固定組織用(yòng)固定液保存常溫運輸即可(kě),如有(yǒu)自發光應避光運輸。

  2、一些特殊結構或者部位送樣時附圖譜或者說明,确保能(néng)夠快速準确切到該區(qū)域。

  3、-20°保存切片

  特殊位置切片:

  實驗介紹:特殊位置切片是在普通石蠟切片的同時,通過顯微鏡觀察定位所需的特定區(qū)域,切片時可(kě)能(néng)會調整蠟塊的方向導緻非特定區(qū)域組織不完整,該實驗項目存在一定的風險性概率。特殊位置切片一般不建議反複多(duō)次切片,最佳建議一次性找到所需特定區(qū)域,并切完足夠備用(yòng)(後續切片再次修蠟塊會損失一部分(fēn))。常見特殊位置切片:斑馬魚、血栓、耳蝸、切小(xiǎo)魚的性腺,視神經乳頭,腦的特殊區(qū)域等。

  實驗交付:有(yǒu)特殊位置的切片。

  實驗步驟:将修整好的蠟塊置于石蠟切片機切片,邊切邊借助顯微鏡觀察,直至到要求區(qū)域開始留片,厚3-4μm。切片漂浮于攤片機40℃ 溫水上将組織展平,載玻片将組織撈起,60℃ 烘箱内烤片。水烤幹蠟烤化後取出常溫保存備用(yòng)。

  送樣及運輸保存要求:固定組織或者組織蠟塊,常溫運輸保存。

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